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流式细胞仪操作步骤
来源:凯瑞力枫  发布时间: 2013-11-20 06:09

本流式细胞仪的各通道所对应荧光染色/料如下

9.jpg

 

一. 流式细胞仪软件操作步骤

下述描述仅限于软件操作的记录操作

1. 开机(按流式细胞仪机房操作指南操作);

2. 打开 CellQuest Pro (流氏细胞仪操作)软件

依据快捷菜单的指示,画出数个门( “黑”图 (一般至少是3个),即数据显示与记录图。

3. 选用菜单Acquire 下拉菜单中的connect (使计算机与流式仪相连)

4. 设定数据存贮位置

选用菜单Brown Untitle下拉菜单下的 Data,寻找适宜位置,建立文件夹

注意下拉菜单下的第二项选择

 1.jpg

应用New键和 Choose键(以确定所得数据的存储位置)

   在存贮时,点击Brower, 在对话框中有两个 Change按钮

                           第二个Change按钮用于改变每个数据存储时的文件名字依

5. 应用apple +数字键1234出现4个对话框 (用于设计仪器记录时的记录条件),

      Detector, Threshold, Compensation and Status 

      上述四项在做双重 ~ 四重染色时要用到(见下文)。

6. 设定通道名字

在所画“黑”图的通道的名字上直接点击, 随之更改通道的名称(据你的实验而定)

  如: CD4Fox3 CD 121NK1.1等。

7. 设定、修改和限定门 Gate

    利用所画“黑”图之左边的快捷键,画出几个门,如:门R1, R2R3等以设定门Gate

    在菜单Gate下拉菜单下,设定 (在如下的对话框中进行设定) 修改和限定门的范围

8.jpg

设定的参数是根据我们每个人的具体实验而定,and 是同时满足的意思。据此,限定了了所记录细胞的种类。

8. 请熟悉所画的“黑”图之左边的快捷键

     请找到画阳性与阴性区域的 “十字线”快捷键 

9. 设定记录模式(根据你的需要,也可以应用同一模式设定分析模式)

      找到Inspector得到如下的对话框              

               3.jpg 

10.设定补偿等

 Detector对话框中的Mode项的选择

                      4.jpg

11. 设定所记录细胞数目

Acquisition & Storage 下拉菜单中寻找

                  5.jpg

12. 实时显示所记录细胞数

Acquisition & Storage 下拉菜单中寻找

       7.jpg

13.  如何记录  选用菜单Aquiresition Control命令进行记录出现下述对话框

                          6.jpg 

   Setup激活时:进行仪器状态的调试(此时对照组的细胞流经探测管);

换言之,此时不进行数据的记录。

    Acquire激活:进行数据的记录(此时实验组的细胞流经探测管);

        数据记录完后,要应用同一对话框中的Save键进行数据储存。

 20. 关机(使电脑与流式仪分开):

在最左侧的菜单中,找到下拉菜单,寻找logout

21. 关机后按照流式细胞仪室的指南操作进行

 

注意:加压阀钮(工作状态时它应对向你,关机后的反向与你)

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